Comunicación
Nº 026
Comunicación |
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Dr. Jorge Ugalde P.; Dra. Rocío Murillo; Tec. Med. Fabiola Carvajal; Tec. Med. Julia Amón M.
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En el presente trabajo utilizamos el material de biopsias gástricas enviadas del Servicio de Gastroenterología, las muestras corresponden a especímenes obtenidos a pacientes con diversa patología gástrica, son fijadas en formol al 10%, tamponado, con una media de 20 horas, son incluidas en parafina de forma automática en un procesador marca LEICA , en doce pasos de una hora, se deshidrata y se incluye en parafina, para luego ser bloqueada en parafina y se corta a 5 micras en un microtomo, obteniendo dos cortes: uno para colorear mediante la técnica de Hematoxilina Eosina, y el otro corte mediante la técnica de Giemsa, utilizando el horno de microondas y la técnica de Giemsa modificada.
Nosotros usamos como base la técnica de Romanowsky- Giemsa, que se utiliza en la tinción de médula ósea embebida en plástico, fijando los tejidos en formalina al 10 % e hidratando mediante los pasos convencionales, cuando llegamos al baño de agua, separamos las placas de tinción especial y procedemos a la técnica:
Las soluciones necesarias son:
* Solución de trabajo de Giemsa:
-- Giemsa Stock solution (merck;prod 9004), 1 Ml.
-- Agua destilada 47 ml.
-- 01 M de buffer fosfato, pH 5 1.2 ml.
* Alcohol isopropílico
* Alcohol etílico al 96 %
EQUIPOS NECESARIOS:
* Horno de microondas marca Whirpool,.(Figura 1)
* Cubetas para tinción . Coplin.Brand. 4728. (Figura 2)
TECNICA
1.-Hidratamos hasta el agua destilada.
2.-Solución de giemsa de trabajo, 50 ml, en
3.-Irradiamos a : Power10 de fuerza, 1.40 min.
4.-Alcohol etílico de 96 % varios pasos.
5.-Isopropanol 30 segundos.
6.-Deshidratar en isopropanol 2 min.
7.-Aclaral en xilol y montar.
La solución de trabajo preparada, puede utilizarse por dos o tres veces dependiendo de la cantidad de muestras.
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