Congreso Virtual sobre Anatomía Patológica

606. Foro técnico


Direccion de contacto
Blanca Palomeque Castro. blancatsap@yahoo.es

TINCIÓN DE GIEMSA PARA HISTOLOGÍA. DOS PROTOCOLOS DE ACTUACIÓN

Blanca Palomeque Castro[1], Alfredo Ramos Pastor[1], Gima Varona Esquivel[2]
(1) Hospital Universitario Príncipe de Asturias. Alcalá de Henares. Madrid ESPAÑA
(2) Hospital General Universitario de Guadalajara ESPAÑA

Resumen

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TINCION DE GIEMSA PARA HISTOLOGÍA. DOS PROTOCOLOS DE ACTUACIÓN

 

 

El reactivo de Giemsa es un colorante salino formado por eosinatos de azur y de azul de metileno, dando como resultado una coloración polícroma, que permite observar la  arquitectura del tejido.

 

La eosina, como colorante ácido, tiñe el citoplasma celular y las estructuras ácidas hísticas (como los gránulos de los leucocitos polinucleares eosinófilos).Los azures y el azul de anilina, como colorantes básicos, tiñen los núcleos celulares,  las estructuras ácidas del tejido y le otorgan un componente metacromático al colorante.

 

En nuestro servicio utilizamos dos protocolos para la tinción de Giemsa, según el tejido que se vaya a estudiar:

 

  1.   Giemsa Modificado:

 

-Cortes a 4 micras.

-Desparafinar e hidratar.

-Introducir los portaobjetos en solución de Giemsa al 20 % durante 45 minutos.

-Lavar abundantemente en agua corriente.

-Diferenciar en alcohol absoluto, 10 minutos

-Xilol y montar.

 

Este protocolo lo utilizamos para las muestras gástricas, pues obtenemos un punto exacto de diferenciación, para observar adecuadamente el “helicobacter pilorii

 

   2.  Giemsa Directo:

 

-Cortes a 4 micras.

-Desparafinar e hidratar.

-Teñir con la solución comercial de Giemsa  (QCA), directamente sobre el       portaobjetos, en horizontal, durante 10 minutos.

-Lavar abundantemente en agua corriente.

-Diferenciar sucesivamente en:

     Agua acética (7 gotas de Ac. Acético glacial en 100 cc de agua destilada)

     Alcohol de 96

     Alcohol isopropílico

Es conveniente controlar la diferenciación al microscopio.

Deshidratar, aclarar y montar.

 

Este protocolo lo utilizamos para el resto de los tejidos (piel, cilindros de médula ósea, ganglios, incluso en citología, para muestras de orina con sospecha de eosinofilia.)

 

 

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Figura 1 -

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Piel-1-10X Giemsa


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Piel-2-20X Giemsa.


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Figura 3 -

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Piel-3-40X Giemsa


Figura 4 - Piel-4-40X Giemsa
Figura 4 - Piel-4-40X Giemsa


Figura 5 - Piel-5-40X Giemsa
Figura 5 - Piel-5-40X Giemsa


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Figura 6 -

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Piel-6-100X Giemsa


Figura 7 - Médula Osea-1-40X Giemsa
Figura 7 - Médula Osea-1-40X Giemsa


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Médula Osea-2-100X Giemsa


Figura 9 - Médula Osea-3-100X Giemsa
Figura 9 - Médula Osea-3-100X Giemsa


Figura 10 - Ganglio-1-20X Giemsa
Figura 10 - Ganglio-1-20X Giemsa


Figura 11 - Ganglio-2-40X Giemsa
Figura 11 - Ganglio-2-40X Giemsa


Figura 12 - Ganglio-3-40X Giemsa
Figura 12 - Ganglio-3-40X Giemsa


Figura 13 - Ganglio-4-40X Giemsa
Figura 13 - Ganglio-4-40X Giemsa


Figura 14 - Ganglio-5-20X Giemsa
Figura 14 - Ganglio-5-20X Giemsa


Figura 15 - Ganglio-6-20X Giemsa
Figura 15 - Ganglio-6-20X Giemsa


Figura 16 - Bazo-1-20X Giemsa
Figura 16 - Bazo-1-20X Giemsa


Figura 17 - Bazo-2-60X Giemsa
Figura 17 - Bazo-2-60X Giemsa


Figura 18 - Gástrica-1-20X Giemsa Modificado
Figura 18 - Gástrica-1-20X Giemsa Modificado


Figura 19 - Gástrica-2-40X Giemsa Modificado
Figura 19 - Gástrica-2-40X Giemsa Modificado


Figura 20 - Gástrica-3-100X Giemsa Modificado
Figura 20 - Gástrica-3-100X Giemsa Modificado


Figura 21 - Gástrica-4-100X Giemsa Modificado
Figura 21 - Gástrica-4-100X Giemsa Modificado




Comentarios

- MARIA DOLORES BLANCO FLORES (01/05/2007 19:03:28)

ME RESULTA DIFICIL CONSEGUIR UNA TECNICA DE GIEMSA FIABLE PARA EL HELICOBACTER PILORY.ME RESULTARIA DE UTILIDAD VUESTRA EXPERIENCIA. GRACIAS.

- MARIA DOLORES BLANCO FLORES (01/05/2007 19:04:38)

PROBARE CON VUESTRO METODO MODIFICADO Y OS CUENTO.

- Zulema Ramirez Carmenate (02/05/2007 21:33:18)

Comentaré con mis colegas el empleo este protocolo. Creo que sería de gran utilidad para bazo y ganglio en el estudio del cáncer. Sus láminas están perfectamente visibles.
Gracias por su trabajo

- ESTHER GONZALEZ CONDE (03/05/2007 2:02:55)

Las tinciones especiales de histoquÍmica parecen ser un lujo en muchos laboratorios de Patología, aun cuando son necesarias para realizar diagnósticos específicos (identificar correctamente H. pylori). Probaremos su protocolo de tinción.
DRA. GONZALEZ. SALUDOS DESDE MEXICO.

- BLANCA PALOMEQUE CASTRO (03/05/2007 21:18:04)

Gracias por sus comentarios.
Ojalá les sean útiles estos protocolos. Si tienen cualquier duda, estaremos encantados de intentar aclararla.
Blanca Palomeque.

- Gustavo Leonardo Ayala Álvarez (04/05/2007 2:27:51)

muy prácticos los protocolos.

- FRANCISCO BORJA GUTIERREZ CORRES (04/05/2007 14:22:51)

Hemos realizado la tecnica en nuestro laboratorio y los resultados han sido excelentes, nos ahorra mucho tiempo.

- MARIA DOLORES BLANCO FLORES (04/05/2007 14:56:08)

HEMOS REALIZADO LA TECNICA PERO CON GIEMSA DE CASA COMERCIAL DISTINTA (MERCK). NOS PLANTEAMOS CONTROLAR LA DILUCION DEL COLORANTE PUES HA SALIDO SOBRETEÑIDO. PROBAREMOS DILUYENDO EL COLORANTE. OS CONTERE.

- BLANCA PALOMEQUE CASTRO (05/05/2007 18:22:27)

Buena idea, aunque también pueden probar disminuyendo el tiempo de actuación del colorante, entre 5-7 minutos.

Aunque no sea su caso, también puede suceder que cuando queda poca cantidad de reactivo en el bote, la tinción directa sale sobreteñida ó precipitada.
Lo que hacemos entonces es usar ese bote exclusivamente para su utilización diluido, y abrir un nuevo bote de reactivo para su uso directo.

- Violeta Aragon Carrasco (09/05/2007 1:34:42)


Excelentes microfotografias, aplicaremos sus protocolos en nuestro laboratorio

- Irina hernandez Melendi (17/05/2007 16:32:50)

Buen trabajo, nos gustó mucho el resultado final, probaremos estos protocolos en nuestro laboratorio.

- Aleida Herrera Batista (18/05/2007 1:23:28)

Muy bueno el trabajo Probaré los protocolos en nuestro laboratorio pues estudiamos el efecto del etanol en órganos del sistema inmune. Muchas Gracias por compartir sus resultados

- Mileidys Pérez Gutiérrez (18/05/2007 6:37:16)

Felicitaciones por los resultados y agradezco compartan sus experiencias.

- Belén Z Iglesias Ramirez (20/05/2007 8:17:23)

Muy buen trabajo y excelentes resultados en las laminas. Aunque no es lo comun para nosotros utilizar esta tincion en las laminas para la docencia, las laminas que muestran de piel son excelentes. Lo probaremos en nuestro laboratorio.
Felicitaciones.
Belen Z. Iglesias Ramirez
Dpto de Histologia
ICBP "Victoria de Giron"
Ciudad de la Habana Cuba

- Victor Leonel Argueta Sandoval (22/05/2007 5:31:56)

Usamos el giemsa en extendidos de ganglio linfático y ayudan mucho. Nos hemos acostumbrado al uso en el laboratorio por buscar el Helicobacter pylori. Lo probaremos en otros tejidos. Los felicitol.

- Dania Ledesma (23/05/2007 7:55:41)

Muy interesante su trabajo .
Gracias por compartir sus experiencias.

- Emilio Mayayo Artal (24/05/2007 0:00:55)

Excelente trabajo y muy bonitas fotos. Lo tendré en cuenta para mis estudios. Felicidades a los autores.

- JOAQUINA CAPELLAN GÜEMES (26/05/2007 20:18:43)

Blanca muy buena la tecnica de giensa la he hecho con el metodo normal para digestivo y sale muy bien nosotros lo haciamos con isopropanol , pero con el alcohol salemas nitido. La modificada para la piel tambien sale muy bien .
gracias por informarme de este foro. es muy bueno

- Mirta Garcia Jardon (02/06/2007 14:56:19)

Muy buena la técnica y preciosas fotos. Lo que veo de más valor es que a los hematólogos les será más fácil correlacionar nuestros hallazgos en tejidos con los de ellos en medulogramas pues usariamos la misma coloración con la que ellos están más familiarizados. Nosotros usamos esa para el H. Pylori sin tan bonito contraste y también nos da muy a menudo positiva. Los felicito pues las imágenes quedaron preciosas con esa coloración .

- Nancy Brizuela Pow Sang (04/06/2007 7:25:21)

Felicitaciones, voy a aplicar el protocolo de Giemsa modificado, a ver como nos va.

- Claudia Roche Albernas (25/06/2007 0:34:38)

En nuestro departamento utilizamos con frecuencia esta técnica para facilitar la obsevarción del H. pylori en biopsias gástricas y duodenales y nos ha dado buenos resultados, sin embargo no la hemos empleado en otros tejidos. Así que nos resulta interesante y accecible la utilización de esta tinción en otras muestras por lo que la pondremos en práctica.

- Claudia Roche Albernas (25/06/2007 0:35:41)

En nuestro departamento utilizamos con frecuencia esta técnica para facilitar la obsevarción del H. pylori en biopsias gástricas y duodenales y nos ha dado buenos resultados, sin embargo no la hemos empleado en otros tejidos. Así que nos resulta interesante y accecible la utilización de esta tinción en otras muestras por lo que la pondremos en práctica.

- Julio Cesar Perez Suarez (03/07/2007 17:22:16)

julio César Pérez 3/07/07
Ha utilizado la solución May and Grunwald´s para Médula Osea?

- BLANCA PALOMEQUE CASTRO (08/07/2007 22:07:53)

D. Julio Cesar Perez:
Disculpe la tardanza en contestar pero he estado unos días fuera sin posibilidad de conectar a Internet.

Nunca hemos utilizado la solución May Grünwald en tejido, sólo ocasionalmente para material citológico secado al aire y en extendidos.

Intentamos simplificar al máximo los protocolos y al obtener una buena coloración con el Giemsa, no nos hemos planteado otras alternativas.


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