TINCION DE GIEMSA PARA HISTOLOGÍA. DOS PROTOCOLOS DE ACTUACIÓN
El reactivo de Giemsa es un colorante salino formado por eosinatos de azur y de azul de metileno, dando como resultado una coloración polícroma, que permite observar la arquitectura del tejido.
La eosina, como colorante ácido, tiñe el citoplasma celular y las estructuras ácidas hísticas (como los gránulos de los leucocitos polinucleares eosinófilos).Los azures y el azul de anilina, como colorantes básicos, tiñen los núcleos celulares, las estructuras ácidas del tejido y le otorgan un componente metacromático al colorante.
En nuestro servicio utilizamos dos protocolos para la tinción de Giemsa, según el tejido que se vaya a estudiar:
1. Giemsa Modificado:
-Cortes a 4 micras.
-Desparafinar e hidratar.
-Introducir los portaobjetos en solución de Giemsa al 20 % durante 45 minutos.
-Lavar abundantemente en agua corriente.
-Diferenciar en alcohol absoluto, 10 minutos
-Xilol y montar.
Este protocolo lo utilizamos para las muestras gástricas, pues obtenemos un punto exacto de diferenciación, para observar adecuadamente el “helicobacter pilorii”
2. Giemsa Directo:
-Cortes a 4 micras.
-Desparafinar e hidratar.
-Teñir con la solución comercial de Giemsa (QCA), directamente sobre el portaobjetos, en horizontal, durante 10 minutos.
-Lavar abundantemente en agua corriente.
-Diferenciar sucesivamente en:
Agua acética (7 gotas de Ac. Acético glacial en 100 cc de agua destilada)
Alcohol de 96
Alcohol isopropílico
Es conveniente controlar la diferenciación al microscopio.
Deshidratar, aclarar y montar.
Este protocolo lo utilizamos para el resto de los tejidos (piel, cilindros de médula ósea, ganglios, incluso en citología, para muestras de orina con sospecha de eosinofilia.)