Congreso Virtual sobre Anatomía Patológica

986. Foro técnico

Sección de consultas del Foro Técnico

Comité Organizador[1]
(1) Hospital General de Ciudad Real ESPAÑA

Objetivos

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A iniciativa de Doña Blanca Palomeque Castro, del Hospital Universitario Príncipe de Asturias, hemos creado esta sección para que usted pueda exponer sus dudas sobre técnicas de tinción histoquímicas, inmunohistoquímicas, biología molecular y otros métodos no descritos en los trabajos expuestos en el foro técnico.

 

Os animamos a exponer brevemente vuestras experiencias y ayudar a resolver las dudas que puedan plantease en esta área.

Lithogenesis dingey, dicephalous xantholine. Cinesonography cameraman apograph etherification corticosubcortical obtuse lionize, woodless cataclastic megalomastia. esgic disregard aleve prozac online macroetching wellbutrin online osteocartilaginous stk phototropism microfilm induration tadalafil seroxat deploying order xenical spoofing montelukast spoor purchase viagra generic vicodin alprazolam online order soma buy hoodia strange gliacyte tretinoin celebrex inconvertibility afetoprotein pediculosis ultracet order cialis online diazepam buy propecia zopiclone tretinoin order cialis online hoodia generic zocor furosemide aleve chinkolobwite strobotac rollability augmentin tramadol incidence generic prevacid escitalopram paroxetine allegra generic plavix ambien generic zocor glucophage sapidity claw cheap tramadol planeness esomeprazole order adipex hydrocodone postillion buy fioricet wellbutrin cetirizine gabapentin buy carisoprodol cozaar generic plavix testa paxil propecia online prilosec order soma buy soma online buy hydrocodone buy carisoprodol finasteride zopiclone generic xanax heterotropy norco generic norvasc cheap alprazolam plasmagene furosemide cipro citalopram lifemanship diflucan generic soma atorvastatin snack cipralex buy phentermine online glucophage gaiter thymodin buy prozac zanaflex buy hydrocodone online zoloft tylenol diazepam buy xenical buy fioricet online nexium online fexofenadine generic prozac sniffy cheap cialis online xanax online buy diazepam diazepam online ambien online ciprofloxacin cheap soma losartan sumatriptan keflex adipex online lipitor optimality order fioricet motrin losartan zyrtec order viagra citalopram vardenafil cheap levitra viagra online buy xanax online steatadenoma vineyard effexor zyrtec sildenafil prilosec buy prozac levitra cheap tramadol online woollen menses cipro valium online ibuprofen lunesta grogram generic phentermine atenolol buy viagra online celebrex furosemide buy wellbutrin buy soma online ultram orlistat tadalafil ultram levitra online lisinopril purchase viagra sonata geomagnetic buy carisoprodol vicodin online generic cialis online valium fioricet online sertraline generic vicodin order vicodin online order vicodin online severance winsome levy hoodia online zolpidem buspirone azithromycin buy cialis online spanned clopidogrel generic soma misengagement ultram buy tramadol online simvastatin proscar ativan benadryl purchase xanax valium buy hydrocodone online cialis benadryl alprazolam online levitra xanax online septaria metformin buy cialis hydrocodone online picnometer buy valium ultram online ativan blepharorrhaphy lorcet shakeproof viagra online buy levitra online purchase xanax tretinoin simvastatin purchase valium purchase xanax subsume angulation titanite celexa zyloprim meridia online order cialis online propecia online order hydrocodone generic zocor shoaling buy vicodin generic nexium zoloft facture purchase phentermine cetirizine cheap cialis order vicodin costectomy cheap meridia lansoprazole proscar buy valium cheap cialis online zoloft online zopiclone buy fioricet alendronate premarin buy tramadol online buspirone seroxat purchase xanax

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Comentarios

- Mirta Garcia Jardon (02/06/2007 14:37:10)

Dr. Rolando Alvarado: Nosotros hacemos a veces (no de rutina) fijación rápida de los fragmentos ya seccionados y en las cápsulas listas para procesar en casos de emergencia/apuro en microondas. No difiere del calor directo en baño maría que se utilizaba antes de existir el microondas. Solamente requiere controlar el tiempo y el % de la formalina (concentraciones más altas demoran menos tiempo).

- BLANCA PALOMEQUE CASTRO (01/06/2007 19:34:37)

Francisca, creo que la mayoría hemos tenido problemas con la eosina.
Nosotros usabamos eosina-floxina alcohólica (con adición de 5 cc de a. acético por litro de eosina) preparada por nosotros, teñimos unos 400 cristales diarios. Cada día la filtramos , desechamos unos 100-200 cc. de la usada (1 litro)y añadíamos nueva.
Obteníamos buenos resultados.
Como la carga de trabajo ha aumentado mucho, decidimos utilizar la solución comercial, de la casa Microm y la que nos trajeron de prueba iba bien. Cuando la hemos comprado ha sido un desastre, prácticamente no tiñe desde el principio.
No sé si será , como dice Borja , que también esta partida estaba defectuosa, aunque es otra casa comercial.

Lo que si es cierto, es que si el azuleamiento de la hematoxilina lo realizas con agua amoniacal, es imprescindible un lavado exhaustivo antes del paso de la eosina, porque sino estarías alterando el PH de la eosina que debe ser ácido.

Nosotros observamos que , aún siendo la misma eosina, la de la batería manual nos duraba más que la del teñidor automático, pensamos que por un lavado tras el agua amoniacal más intenso en la manual.

Un saludo

- BLANCA PALOMEQUE CASTRO (01/06/2007 20:12:55)

D. Julio Cesar Lescano:

No sé desde que país nos escribe, aquí en España, para montar técnicas inmunohistoquímicas automatizadas las casas comerciales (Dako, Menarini..)suelen hacer demostraciones de sus aparatos in situ , aportando incluso muestras de reactivos para su prueba.
Una vez tenga decidido el tipo de laboratorio que desea montar, pienso que lo mejor sería dirigirse a las casas comerciales para que hagan las demostraciones y ofertas y poder escoger.
Soy técnico, no doctora. Si plantea una cuestión más concreta, iremos intentando solucionar sus dudas.

- BLANCA PALOMEQUE CASTRO (21/06/2007 19:30:05)

D. Daniel Horacio Cabral:

La mayor diferencia entre la hematoxilina de Karazzi (ó Carazzi) y la de Harris es que la de Harris es una coloración regresiva , es decir, primero se sobrecolorea y luego se diferencia (habitualmente con alcohol clohídrico) hasta llegar a un punto óptimo de coloración. Posteriormente debe "azulearse" con agua amoniacal .

La de Karazzi es una coloración progresiva, en la que no es necesario diferenciar.
Se comportaría de forma similar a la hematoxilina de Mayer que también es progresiva. Con ellas se obtienen muy buenos resultados para colorear núcleos, aunque para los componentes basófilos extranucleares es algo débil.
Un saludo

- BLANCA PALOMEQUE CASTRO (21/06/2007 19:46:27)

Dª Leticia Gomez:

Nosotros usamos portas con polilisina cuando pensamos que pueden desprenderse los cortes. Quedan más limpios que con la albúmina glicerinada.

Ó bien se pueden usar directamente los portas de inmunohistoquímica que vienen ya preparados ó preparar una caja de portas extendiendo una capa de polilisina comercial.

En cuanto a los ojos, nunca hemos tenido oportunidad de procesarlos completos.
Sólo nos han llegado córneas, que se seccionan y realizamos el bloque orientando los fragmentos de canto.

Un saludo.

- BLANCA PALOMEQUE CASTRO (22/06/2007 20:47:16)

Leticia, a las córneas sólo les hemos hecho H-E , pero si en tu laboratorio están haciendo estudios específicos es posible que necesiten tambier estudiar las alteraciones del estroma corneal (que se compone fundamentalmente de proteoglicanos y fibras de colágeno) y para ello utilicen el Azul alcián que tiñe los mucopolisacáridos ácidos, con el Pas que tiñe los neutros (membrana basal) ,obtendrán lo que supongo que necesitan para el estudio.

Estoy de acuerdo contigo en que este foro está resultando muy interesante, desde aquí quiero dar las gracias al Comité organizador . Lástima que sólo nos queden unos días. Espero que podamos compartir experiencias de nuevo en el próximo CVHAP.
Saludos

- BLANCA PALOMEQUE CASTRO (27/06/2007 21:01:28)

Ricardo García:
No conozco exactamente la tinción de Gallyas, pero creo que se usa en neuropatología.
Si es similar a la tinción de Bielschowsky (primero se tiñe con nitrato de plata y tras lavado se tiñe con plata amoniacal , posteriormente se reduce con formol) se puede repetir de nuevo la incubación en la plata amoniacal hasta que la impregnación sea suficiente.
Para cortes en parafina , la impregnación en el primer nitrato de plata debe hacerse a 37º , lavar, reducir con formol, lavar e incubar con la plata amoniacal, lavar y reducir de nuevo con formol.

En este caso es una tinción basada en la reducción externa de los complejos amonio-argénticos previamente depositados en el tejido, y no en la reducción del propio tejido sobre sales de plata como en la plata metenamina que ha puesto Francisco Borja anteriormente.

Para no quedarnos con la duda de qué tipo de tinción es la de Gallyas ¿puedes ponernos la técnica?
Te lo agradecería ( aunque voy a estar fuera, espero que se podrá consultar aunque se acabe el CVHAP)

Un saludo

- BLANCA PALOMEQUE CASTRO (21/05/2007 23:59:06)

Tenemos problemas para conseguir una técnica efectiva para el blanqueamiento de la melanina, tanto del material fijado en formol como una vez procesado , cortado y desparafinado.
Si en algúno de los Servicios de Anatomía Patológica se está realizando alguna técnica con este objetivo , sería muy útil poder ponerla en común.

Atentamente:

Blanca Palomeque Castro (TSAPC)
Hospital Universitario Príncipe de Asturias
Alcalá de Henares (Madrid)

- BLANCA PALOMEQUE CASTRO (24/05/2007 19:41:56)

Gracias. La probaremos. Saludos

- BLANCA PALOMEQUE CASTRO (29/05/2007 20:47:04)

D. Rolando Alvarado:

Nosotros no solemos usar microondas para la fijación porque al adquirir altas temperaturas el tejido , no es posible realizar técnicas inmunohistoquímicas con garantías.

No obstante, en el libro "Laboratorio de Anatomía Patológica" del Dr. Raimundo García del Moral dan como tiempos para la fijación con microondas, 3 min a 325 watios de potencia.

- BLANCA PALOMEQUE CASTRO (29/05/2007 20:53:52)

Joaquina, aunque la Hematoxilina de Harris es la más utilizada en la tinción citológica de Papanicoloau (nosotros diferenciábamos con alcohol clorhídrico al 0,5 % en alcohol de 70º ), actualmente estamos usando la Hematoxilina de Karazzi (50 segundos), obteniendo mucho mejores resultados.
No es necesario diferenciar.

- BLANCA PALOMEQUE CASTRO (30/05/2007 18:11:27)

Lo siento, acabo de ver que hay un error en los tiempos que puse para la tinción con la hematoxilina de Karazzi en el Papanicoloau, no son 50 segundos (ese era el tiempo usado con la Hx de Harris), sino 5 minutos.

- BLANCA PALOMEQUE CASTRO (30/05/2007 18:18:16)

Para la decalcificación de huesos (excepto cilindros de médula ósea) nosotros usamos formol nítrico al 7% , con buenos resultados

- BLANCA PALOMEQUE CASTRO (09/07/2007 21:30:07)

Dª Elixabete Fuentes:
Perdón por el retraso en contestar.

La Hx de karazzi es una hematoxilina acuosa cuyo alumbre es potásico y la oxidación a hemateina se realiza por medio del iodato potásico. También lleva glicerina para prevenir la sobreoxidación de la hemateina.
La tinción nuclear es menos intensa que con la de Harris, y más uniforme.
Al ser una coloración progresiva no es necesario diferenciar, simplemente lavar en agua. Además si se sobrepasa el tiempo óptimo de tinción con el colorante , no se sobrecolorea.
Un saludo
Nosotros la utilizamos como coloración nuclear en la técnica del PAS, en el Papanicoloau para citología y en algunas técnicas inmunohistoquímicas.

Aunque existe la solución comercial, ésta es la preparación manual:

-Hematoxilina..... ...........1 gr
-Iodato potásico.............0,2 gr
-Alumbre potásico.........50 gr
-Gricerina bidestilada...200 gr
Agua destilada.............800 gr

Disolver en agua el iodato potásico y a continuación el alumbre potásico en agitación, despues añadir la hematoxilina y la glicerina. Dejar madurar la solución un par de meses. Duración prácticamente indefinida.

Tiempo de tinción : 15 minutos en tejidos, 5 minutos en citologías.

- Gima Varona Esquivel (22/09/2008 18:21:04)

Los portafiltros que nosotros usamos, para el procesado de las orinas, son los llamados SWIN-LOK FILTER HOLDER, de la casa Whatman, (Stock Number 420200-25 mm). Y la membrana la NUCLEOPORE POLYCARBONATE, tambien de la misma casa.
Espero haberle sido de ayuda.

- Daniel Horacio Cabral (19/06/2007 23:30:09)

es muy interesante esta seccion ,y deseo informacion sobre el aclarado de ganglios en piezas oncologicas desde ya gracias

- Daniel Horacio Cabral (20/06/2007 1:10:58)

La hematoxilina de Karazzi que diferencia tiene con las otras hematoxilinas.gracias

- ELIXABETE FUENTES GUTIÉRREZ (30/06/2007 12:51:16)

hola, me gustaria conocer las características de la hx de Karazzi. saludos

- JULIO CESAR LESCANO SORIANO (30/05/2007 23:44:28)

DRA. BLANCA PALOMEQUE LA SALUDO CON TODO RESPETO Y FELICITACIONES POR LA INICIATIVA DE LA TECNICAS DE INMUNOHISTOQUIMICA,HISTOQUIMICA,CITOLOGIA,O BIOLOGIA MOLECULAR,PARA APRENDER MAS QUE EN TODO DESEARIA SABER COMO SE PUEDE IMPLEMENTAR UN LABORATORIO DE INMUNOHISTOQUIMICA,CUANDO RECIEN SE COMIENZA A TRABAJAR,POR FAVOR ! SOBRE TODO CUANDO SE DESEA DEDICAR A LA BIOLOGIA MOLECULAR DEL CANCER, DISCULPE LA PREGUNTA PERO SOY UN PROFESIONAL DE LA PATOLOGIA, ESTOY INTERESADO EN LAS TECNICAS DE TINCION INMUNOHISTOQUIMICAS,HISTOQUIMICAS,Y SE QUE LA DE BIOLOGIA MOLECULAR SON CARISIMOS PERO EN LO REFERENTE A TODO MENOS DE BIOLOGIA MOLECULAR,EN LO QUE ES EQUIPOS,REACTIVOS ETC, POR FAVOR! Y MUCHAS GRACIAS DRA. BLANCA

- Rolando Alvarado Anchisi (24/05/2007 21:07:19)

¿Quién tiene experiencia con el procesamiento tisular con microndas?

- FRANCISCO BORJA GUTIERREZ CORRES (24/05/2007 10:04:46)

Para la decoloracion de la melanina se puede emplear la tecnica con permanganato potasico 0.25%

soluciones:

Permangato potasico al 0.25%
Acido oxalico 5%

Tecnica:

-Desparafinar e hidratar.
-Permanganato potasico 0.25%....... 5 min.
-Lavar en agua corriente.
-Acido oxalico 5%............5 segundos.
-Lavar en agua corriente.
-Deshidartar y montar.

Como control de la tecnica realizar un hematoxilina-eosina, y comparar con la muestar en la que se ha realizado la tecnica del blanqueamiento con permanganato potasico al 0.25%.

Un Saludo

- FRANCISCO BORJA GUTIERREZ CORRES (01/06/2007 10:44:21)

Nosotros tambien hemos tenido ese problema, con la eosina pura de la casa Merk que la diluiamos a 1%. Debe de ser una partida que estaba defectuosa. este problema lo han tenido en mas hospitales.

- FRANCISCO BORJA GUTIERREZ CORRES (01/06/2007 10:49:45)

Julio cesar Lescano Soriano concreta mas la pregunta y asi entre todos te podremos ayudar.

- FRANCISCO BORJA GUTIERREZ CORRES (04/06/2007 10:46:41)

Nosotros tuvimos problema con la eosina en polvo (eosin Y) ci45880 de 100 gr casa merck. esta la diluimos en agua destilada al 1%. ( NO AÑADIMOS ACIDO ACETICO) Tuvimos problemas con mas o menos unos 4 o 5 botes de 100 gr. Esto tambien ocurrio en hospitales cercanos.

- FRANCISCO BORJA GUTIERREZ CORRES (26/06/2007 13:46:45)

Leticia gomez la eosina no se diferencia y el agua amoniacal es para el azuleamiento de la hematoxilina y el agua clorhidrica 0.5% para diferenciar la hematoxilina , pues es una tecnica regrasiva. despues de emplear la eosina si es acuosa lavarla en agua y si es alcoholica en alcoholes de 96ª.

Un saludo

- FRANCISCO BORJA GUTIERREZ CORRES (26/06/2007 13:50:04)

Ricardo Gracia puedes intertar esta tecnica de plata
Tecnica Plata Metenamina

1.-Desparafinar e hidrtar
2.- Acido cromico 5% .....60 min.
3.- Lavar agua corriente.
4.- Bisulfito sodico 1%.....1 min.
5.-Lavar agua destilada.
6.-Solucion de plara metenamina en estufa a 60º.......60 min.( controlar que adquiera un color tabaco oscuro)
esta se hace a partes iguales esnte Ay B

A)Solucion madre de plata metenamina:

Nitrato de plata 5%......2,5cc.
Metenamina 3%...........50cc
agua destilada............. 52.5cc.

B) Solucion Borax 5% (teraborato sodico)

7.- Lavar en agua destilada.
8.- Clorruro de oro al 0.2%.....2 min.
9.- Lavar en agua destilada.
10.- Hiposulfito sodico 5 %------5 mim.
11.- Lavar en agua corriente
12.- Deshidratar y montar.

- MARIA DOLORES BLANCO FLORES (30/05/2007 23:06:48)

EN NUESTRO HOSPITAL FIJAMOS LA PIEZA EN FORMOL UN DIA. POSTERIORMENTE CORTAMOS EN LA SIERRA E INTRODUCIMOS LOS FRAGMENTOS SELECCIONADOS EN SOLUCION DESCALCIFICADORA LISTA PARA SU USO Y COMERCIALIZADA POR SHANDON.

- Noemi Isabel Gercek (27/05/2007 2:59:59)

Tenemos dificultades para el procesamiento de uñas, quisiera saber cual es la mejor técnica o las mas empleada. Gracias.

- Noemi Isabel Gercek (28/05/2007 3:42:15)

Dra. Joaquina Capellan Guemes.
Agradezco la información, probaré la técnica y espero buenos resultados.
Muy amable de su parte.

- JOAQUINA CAPELLAN GÜEMES (27/05/2007 13:28:36)

Una tecnica para procesar la uña es sencilla da buenos resultados:
*introducir la uña en fresco ( si viene con formol se endurece y no se puede ablandar) en una solucion de : - - agua destilada ------------------ 50cc. - - con una aspirina ( ac. salicilico ) . (durante uno a tres) dias cambiando la solucion a diario , comprobando su dureza.
* Fijar la uña con formol
* Procesamiento de rutina

- JOAQUINA CAPELLAN GÜEMES (26/05/2007 22:21:37)

Sobre la mejor manera de diferenciacion de la hematoxilina en la tincion citologica de PAPANICOLAU . Estamos diferenciandolo con agua clorhidrica y con dos minutos en Hematoxilina de Harris , la tincion es manual.
GRACIAS

- JOAQUINA CAPELLAN GÜEMES (30/05/2007 13:21:16)

Muchas gracias Blanca, probaremos,a ver que tal los resultados.
Hasta la proxima!

- MIKEL ALONSO CALABOR (30/05/2007 13:44:16)

Para la decalcificacion de las cabezas femorales realizamos cortes de 2-4mm de espesor con la sierra electrica pero a pesar de el poco grosor la decalcificacion es lenta con el acido formico.
Agrdeceria algun consejo o sujerencia, GRACIAS.

- FRANCISCA SANCHEZ GARCIA (01/06/2007 18:11:53)

Hola es verdad que debo concretar más y lo que sucede es que la eosina que empleo es acuosa al 1%, la hago madurar y le pongo una gotita de acido acetico en el momento de uso y cuando llevo un par de días de utilizarla ya no tiñe. Estoy hablando de unos 50-60 cristales por dia,y eso no sucede siempre solo hay rachas y no consigo ajustarla.
Espero haberme explicado mejor y que encontremos la solución.
Y si puede ser defectuosa pero entonces a mi me han tocado al menos tres botes, un saludo

- FRANCISCA SANCHEZ GARCIA (31/05/2007 22:58:07)

Hola soy una TEAP del hospital de Montilla que esta teniendo problemas con la eosina acuosa.
Utilizamos eosina acuosa en la hematoxilina-eosina rutinaria de las biopsias y a los dos días de tener el teñidor con ella ya no tiñe, es decir va perdiendo color.
Existe alguien que sepa darme una solución ya que no se por donde atacar
Un saludo.

- FRANCISCA SANCHEZ GARCIA (26/06/2007 14:43:31)

Hola a todos ya he visto que me habeis dado muchas soluciones con respecto a la eosina pero pq en las intraoperatorias que solo lavamos con agua y no diferenciamos con nada ni hx ni eosina sale perfecta y en la tinción rutinaria no hay forma de ver ese rojo intenso de la eosina.
Muchas gracias por vuestras respuestas y yo tampoco quiero que se acabe todo este foro pq es interesante: por cierto sabemos algo a cerca de las oposiciones en la Junta de Andalucia.
Un saludo

- Francisco Rubèn Brizuela Pow Sang (06/06/2007 4:59:38)

Me interesaría que alguien pudiera ilustrarme sobre los exámenes auxiliares a tener en cuenta cuando existen necropsias en la que se sospecha que pudiera haber como causa shock anafiláctico tanto en anatomopatología asi como en laboratorio.

- leticia gomez (21/06/2007 8:31:32)

Respecto al tema de la eosina en nuestro laboratorio usamos eosina QCA al 1% durante 3 minutos y luego de lavar en agua la diferenciamos en agua amoniacal, anteriormente habia aqui eosina acuosa al 2% y daba unos resultaodos bastante nefastos. Pienso que la diferenciación tanto de la hematoxilina con Oh clorhídrico y la eosina con agua amoniacal es bastante importante ya que mejora mucho los resultados, por lo menos a nosotros ya que al principio cuando no teniamos la tinción salia demasiado....enmerdada que dicen en mi tierra.
Ademas tengo unas dudas, respecto a ojos y córneas. Las corneas me dan demasiados problemas a la hora de la tinción (manual) ya muchas veces se despegan del porta, los cortes son finos (3micras) por lo que ese creo q no es el problema, e probado con la glicero albumina que da buenos resultodos (más menos) pero emborrona demasiado el porta dejandolo bastante sucio. Mi otra duda es con los ojos, el cristalino queda demasiado duro despues del procesado con lo que muchas veces estropea los cortes motandose encima de la cornea o del iris e incluso rompiendose.
Gracias de antemano.

- leticia gomez (22/06/2007 8:06:51)

Blanca palomeque:
¿Que técnicas de coloración usais para las córneas? En nuestro laboratorio estan realizando unos estudios y me dijeron que les hiciera PAS Azul Alcian pero yo e probrado esta ytecnica y el PAS normal y este segundo da mejores resultados pues el PAS A.A me colorea todo el estroma corneal lo cual no se si es muy lógico, el Azul Alcian es de PH 2.5.
P.D: Me encanta este foro, no hace ni un año que termine los estudios y a veces me surgen dudas y hasta ahora no tenia a quien preguntar ^^ gracias

- leticia gomez (28/06/2007 14:08:38)

FRANCISCO BORJA GUTIERREZ CORRES
No es una diferenciación exactamente pero...no se como explicarlo, limpia el corte. me explico, si tu pasas de la eosina al agua y luego alcoholes y montaje el corte queda con la eosina demasiado emborronada, fuerte y sucia. Probamos con menores tiempos de eosina pero nada, a nosotros los cortes nos quedan perfectos así, diferenciando la hema en oh clorhidirico y dando un pase por agua amonical despues de la eosina. esta técnica se hace así en diversos hospitales privados de la ciudad.

- leticia gomez (26/06/2007 8:21:47)

Esto se acaba y no mola por que esta bien tener con quien hablar de cosas de anatomia y eso os propongo un lugar :http://groups.msn.com/TEAP es una comunidad hecha para Tecnicos Especialistas en Anatomia Patologica no se si os interesara o no, pero en su momento la creamos los colegas de clase para poder ayudarnos los unos a los otros aunque al final fallo un poco ya que no todos conseguimos trabajar de lo nuestro, asi que.... eso ahi os lo dejo ^^

- leticia gomez (16/08/2007 12:22:25)

hola alguien sabe algun protcolo de diaforosa que sepa seguro que salga?

- Ricardo García (23/06/2007 15:06:49)

Hola, llevo unos días intentando hacer la plata de Gallyas, pero no consigo que el tejido tome el color marrón (tábaco rubio claro) durante la incubación en la solución de trabajo. Salen de color gris. La solución de trabajo esta bien preparada, pero ya no se que hacer para que salga bien.
Un saludo

- Ricardo García (29/06/2007 10:41:49)

Hola, muchas gracias. La técnica de Gallyas es para teñir la proteina tau, segun parece queda mejor que la inmuno con el anticuepo de la proteina tau.
La técnica es esta:
1. Hidratar hasta el agua destilada.
2. acido periodico 5% 5 min
3. lavar con agua destilada 2 veces 5 min
4. solucion alcalina de ioduro de plata 1% 1 min
5. lavar con acético 0.5% 2 veces 5min
6. incubar en la solución de trabajo de 5-30 min a 37º
la solución de trabajo es la mezcla de 3 stock:
Stock I:anhidrido carbonato sódico 5% : se cogen 10 partes
Stock II:nitrato amonio+nitrato de plata+ac. tungtusilicico: se cogen 3 partes
Stock III:nitrato amonio+nitrato de plata+ac. tungtusilicico+formaldehido 35%: se cogen 7 partes.
Se mezclan bien hasta quedar transparente.
7. lavar acético 0.5% 3 min
8. lavar agua destilada 5 min
9. cloruro de oro 5 min (OPCIONAL)
10. lavar con agua destilada
11. fijar con tiosulfato sódico 1% 5 min
12.agua destilada
13. Rojo nuclear 2 min
14. deshidratar y montar

Y a Francisco Borja muchas gracias también, por la plata metenamina, lo único decirle que si le interesa nosotros hacemos la misma técnica pero con menos tiempos y nos queda muy bien. Por ejemplo al preparar la solución de plata no añadimos agua destilda y añdimos 3 cc de borax al 5%, y solo incubamos 30 min.
si te interesa te la doy porque alguna cosa más cambia.
Un saludo

- leandro galvis (18/08/2008 2:54:24)

Cuando hay fala de recursos para adquirir técnica, una técnica como la que describe Gima Varonia Esquivel en su artículo "procesado de citologia urinaria" de este 9° congreso se impone. La dificultad para su aplicación es donde conseguir el dispositivo descrito. Me pueden Uds colaborar? La comunicación ella no a sido posibe

LEANDRO GALVS MORENO

- Jorge Hernández (18/10/2007 23:44:05)

Hola, me llamo jorge Hernández y junto con otros cuatro compañeros estamos haciendo la carrera de tecnicatura superior en esterilización, en la misma estamos llevando a cabo una investigación acerca del biofilm sobre la superficie de los materiales biomedicos. Nuestro objetivo es determinar la presencia de biofilm pre esterilización por oxido de etileno y pos esterilización por este metodo. De acuedo a la bibliografia sabemos que el glutaraldehido al 2% durante 10 Hs. no elimina completamente la población microbiana del biofilm. Nosotros queremos saber qué ocurre con el Oxido de Etileno, si realmente lo elimina o tambien deja una pequeña fraccion de microorganismos. necesitamos saber qué opina de nuestro trabajo y si tienen bibliografia al respecto, tambien si nos pueden guiar un poco. D
Desde ya muchas gracias y esperamos su respuesta.

- ANTONIA MONTES FRANCO (02/12/2007 21:24:31)

¡Hola!Tengo una duda sobre el estudio de los pelos en anatomia.
Me explico:como ver en corte transversal.
Diagonal si sale pero transversalmente salta y queda el hueco.
¿Alguien tiene experiencia en esto?
¿La técnica que se usa para las uñas sería efectiva?
Gracias por vuestra colaboración.
También me gustaría recibir información sobre el proximo Congreso del año 2.008.

- ANTONIA MONTES FRANCO (11/02/2009 22:38:04)

Respuesta:
FRANCISCA SANCHEZ GARCIA (31/05/2007 22:58:07)
La Eosina ya sea alcohólica o acuosa y sus posibles variaciones en tiempos y concentraciones se potencia añadiendo Acido Acético +/- 1% glacial puro diariamente que actuará intensificando su acidofilia y por lo tanto su especificidad al citoplasma y otras extructuras similares.
Esto también se usa para la Hematoxilina ya que en los nucleos los componentes acidofilos existen y por distintos mecanismos de asociación se puede potenciar algunas extruturas del tejido con esta solución.


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