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El
gen c-erb B-2 (HER-2/neu) es un oncogen inicialmente identificado por
transfección de células NIH3T3 con DNA de neuroblastomas y glioblastomas
de rata inducidos por tratamiento perinatal con etilnitrosourea; de ahí
su denominación neu.
 
El
análisis de clones de cDNA del oncogén neu demostró que éste codifica
una proteína transmembranal muy semejante a la proteína codificada por
el oncogen v-erb-B, del virus de la eritroblastosis aviar y responsable
del desarrollo de eritroleucemias y sarcomas en pollos, que, de hecho, es
una forma truncada del receptor del factor de crecimiento epidérmico (EGFR).
Por
su homología con v-erb-B, el neu fue denominado c-erb B-2 o HER-2 (Human
EGFR-2).
El
gen HER-2 codifica una proteína transmembrana. Su parte extracelular es
un receptor que interacciona con un factor de crecimiento todavía no
identificado. Su zona intracelular tiene actividad tirosin-quinasa. La
estimulación del receptor activa la region tirosin-quinasa que fosforila
a una serie de proteínas citoplasmáticas transmitiendo la señal
estimuladora al interior de la célula.
Para
que se produzca la activación de la región tirosin-quinasa es necesario
que la proteína se dimerice; es decir se formen dímeros entre dos proteínas
adyacentes.
El
gen HER-2 forma parte de una familia de genes que codifican receptores con
actividad tirosin-quinasa. Esta familia incluye los genes HER-1 (que es el
EGFR), HER-3 y HER-4.
A
diferencia de HER-2, los factores de crecimiento que se unen a las
porciones extracelulares de las proteínas codificadas por HER-1, HER-3 y
HER-4 son bien conocidos. De forma similar a HER-2, las proteínas de
todos estos miembros de la familia forman dímeros al interaccionar con
sus factores de crecimiento. Se ha visto que HER-1, HER-3 y HER-4 pueden
formar homodímeros (es decir dímeros de dos proteínas iguales; HER1-HER-1
o HER-3-HER-3) o bien heterodímeros (HER1-HER-3). Se ha visto que HER-2
puede formar parte de estos heterodímeros; y se ha dicho que tal vez HER-2
no tenga un factor de crecimiento propio, y que su participación en la
estimulación de la proliferación celular pasa por formar heterodímeros.
Se ha visto que la capacidad estimulante de los homodímeros es menor que
la de los heterodímeros.
HER-2
es un oncogen que, en la especie humana, se suele activar por amplificación
génica. Los tumores con activación de HER-2 tienen más de dos copias
del gen. Este exceso de copias se traduce en un incremento en los niveles
de la proteína codificada por HER-2, una mayor probabilidad de heterodímeros,
y una mayor actividad de estimulación celular.
Significado
biológico de la activación de HER-2
Existen
muchas evidencias in vitro que apoyan la hipótesis de que la activación
de HER-2 confiere una mayor agresividad biológica a las células del cáncer
de mama.
Aunque
la frecuencia de activación de HER-2 varia de serie a serie, se acepta
que HER-2 está activado en un 20-30% de los cánceres de mama. Se han
publicado muchas series distintas discutiendo la influencia real de este
fenómeno molecular, así como su utilidad práctica como factor pronóstico
en el manejo de las pacientes con cáncer de mama. La gran variabilidad de
los resultados de estos estudios radica en diferencias metodológicas así
como en la selección de las pacientes. Sin embargo, una gran mayoría de
estudios apoya la idea que la activación de HER-2 se asocia a un pronóstico
peor en las pacientes con cánceres de mama con metástasis ganglionares.
Sin embargo, existe una controversia en relación al significado pronóstico
de esta alteración en las pacientes con ganglios negativos. En los últimos
años se ha postulado que la activación de HER-2 podría ser de gran
utilidad en la valoración de sensibilidad de los tumores a la
administración de adriamicina, resistencia a tamoxifén, o indicación de
tratamiento con Trastuzumab (HerceptinR).
Métodos
de estudio de la activación de HER-2
Existen
varios métodos para valorar la activación de HER-2.
Como
se ha dicho previamente, HER-2 se activa por amplificación génica. Esto
quiere decir que las células tumorales tienen un número mayor de copias
del gen en relación a las células normales. En las células, el exceso
de copias del gen se corresponde con un aumento en los niveles de RNA
mensajero de HER-2 y se traduce en un aumento en los niveles de la proteína
codificada por HER-2. Esto quiere decir que podemos utilizar distintos métodos
para valorar un mismo fenómeno: métodos de estudio de DNA, de RNA
mensajero o de proteínas.
Métodos
de estudio de DNA: Son el Southern blot,
la
Hibridación cromosómica con sondas fuoresceinadas (FISH),
la PCR diferencial
Esquema
de la técnica de PCR diferencial para análisis de amplificación de HER-2.
Consiste en coamplificar dos genes; uno de ellos (IFN) no está
amplificado, el otro (NEU) es el que se quiere analizar. La comparación
de intensidad de bandas en los geles tras análisis electroforético
permite obtener el resultado.
Ejemplo
de PCR diferencial para análisis de amplificación de HER-2. Nótese que
el cociente de intensidad de bandas en el carril C es parecido al del
control positivo (PC), que corresponde a una línea celular de cáncer de
mama con 8 copias de HER-2.
Métodos
de estudio de RNA: Son el Northern blot,
la
hibridación in situ de RNA, la PCR-Transcriptasa inversa.
Métodos
de estudio de Proteínas: Western blot o inmunohistoquímica.
Todas
estas técnicas tienen ventajas e inconvenientes. Las más fiables son
aquellas en las que la determinación de la activación de HER-2 se
efectua en su contexto morfológico, porque es imprescindible que la
valoración se efectúe exclusivamente en el componente infiltrante.
Aunque patogenéticamente sea difícil de entender para un gen implicado
en la proliferación celular, con cierta frecuencia se observan carcinomas
ductales infiltrantes HER-2 negativos que coexisten con un carcinoma
intraductal (presumiblemente preexistente) que es HER-2 positivo; y en
estos casos el tumor debe ser interpretado como HER-2 negativo.
Todo
esto limita la elección al FISH y la inmunohistoquímica.
La
FDA americana ha aprobado tres métodos para valoración de activación de
HER-2.
Dos
de ellos (Inform/Ventana; Pathvysion/Vysis) utilizan FISH y han sido
aprobados para valoración de HER-2 como factor pronóstico e indicativo
de tratamiento con adriamicina. Un tercer método (Herceptest/DAKO) ha
sido aprovado para valoración de tratamiento con Trastuzumab (HerceptinR).
Desde entonces varios artículos han comparado ambas técnicas con
resultados e interpretaciones distintas.
Recientemente
varios grupos ha comparado la activación de HER-2 medida mediante
Herceptest y los resultados de FISH.
La
correlación es buena para los casos negativos (Herceptest 0 o 1+) y para
los casos claramente positivos (Herceptest 3+). Sin embargo, existen
discrepancias en el grupo intermedio (Herceptest 2+), en las que las técnicas
de FISH sólo detectan amplificación en un 10% de los casos. Estas
discrepancias pueden ser debidas a problemas de sensibilidad del
Herceptest (que detecte expresión no atribuible a amplificación), del
FISH (que sea poco sensible en la detección de amplificaciones de bajo
nivel), a ambas, o que simplemente refleje el hecho que ambas técnicas
estudian el mismo fenómeno desde perspectivas distintas (DNA y proteinas).
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