Sobre el tejido renal congelado se determinó el mRNA de los principales mediadores moleculares de lesión: TGF-ß1, endotelina 1, angiotensinógeno y MDR1 (glicoproteína P), mediante técnica de RT-PCR según procedimiento estándar.

Para cuantificar la expresión de cada gen mencionado, los productos de PCR se separararon mediante electroforesis en gel de agarosa al 3y la intensidad de cada banda se determinó densitométricamente usando el software Visilog 4.1 (Noesis, Velizy, France). Los datos se estandarizaron usando los niveles de expresión de la ß₂-microglobulina como control interno, para normalizar la cantidad de material de partida de cada muestra. Como control de expresión de los marcadores en el riñón se emplearon 15 biopsias renales de adultos menores de 50 años (media 40±8 años).

RESULTADOS

Con respecto a la función renal de los donantes subóptimos, los valores de creatinina fueron normales en el 100% de los casos, en un 14% se detectó hematuria o glucosuria y ningún paciente mostró albuminuria significativa. El 33.2% de los donantes tenían antecedentes de hipertensión arterial.

La prevalencia de las lesiones observadas en los riñones de donantes mayores de 60 años fue elevada. Estas lesiones fueron principalmente glomerulares, el 23.8% de las biopsias presentaron esclerosis glomerular mayor del 20%, 34.1% entre el 10-20%, 26.8% entre 0-10% y sólo en dos casos no existió glomeruloesclerosis. La fibrosis capsular estuvo presente en más de la mitad de las biopsias, siendo de grado leve en el 47.6%. La quistificación glomerular afectó al 51.2% de las biopsias, aproximadamente el 50% fueron grados 0 ó 1 y sólo en un caso afectó a más del 40% de los glomérulos. Las lesiones vasculares (arteriosclerosis, arteriolopatía hialina y elastosis miointimal) afectaron al 51.2% de las cuñas renales, siendo la arteriopatía hialina en el 10.5% y la elastósis miointimal en el 17.5% de las muestras de carácter moderado o severo (tabla 3). Las lesiones túbulointersticiales como la atrofia tubular y fibrosis intersticial fueron patentes en más del 90'% de las biopsias, si bien con variables grados de intensidad..

En dos casos, fue detectada la presencia de un adenocarcinoma de células claras y un carcinoma oculto de células transicionales. Ambas lesiones descubiertas en el momento de la extracción de los órganos tras el estudio microscópico.

La expresión media de mRNA de los tres mediadores de lesión valorados en los riñones de donantes suboptimos, se encontró por encima de la que presentaron los riñones control. En todos los casos estas diferencias fueron estadísticamente significativa (p<0.05, t de Student). Cuando se buscaron concordancias entre la puntuación media total de las lesiones morfológicas y los de creatinina al final del seguimiento clínico del receptor (entre 3 meses y cinco años, media de 29 meses), se encontró una relación positiva signíficativa (r=0511, p=0005) que en el caso de cada una de las lesiones evaluadas considerada individualmente no se obtuvo a excepción de con la arteriopatía hialina (r=0,423, p=0014). Es muy importante resaltar que el númeor de glomérulos esclerosados de las muestras que fueron consideradas aptas para trasplante no guarda relación estadistica alguna con la función renal de los donantes al final del seguimiento clínico. El estudio de marcadores moleculares de lesión mediante RT-PCR semicuantitativa ofreció pobres resultados en cuanto a su relación con la función renal de los receptores al final del seguimiento clínico con excepción de los valores correspondientes a endotelina 1 (r=0,528, p=0,026).

DISCUSIÓN

La biopsia renal con estudio sobre material incluido en parafina en donantes subóptimos añade importante información sobre la validez del órgano para trasplante. (1-9). En los trabajos donde se aduce que la biopsia renal carece de utilidad, no están suficientemente definidos los parámetros histopatológicos estudiados y en general en ellos se ha realizado un análisis de supervivencia del injerto muy superficial (12, 13).

Karpinski y colaboradores recientemente aplicando un protocolo de valoración semicuantitativa de lesiones vasculares, glomerulares y tubulointersticial postulan que el estudio de la función y estructura de los donantes de alto riesgo son necesarios para obtener un buen resultado en el trasplante y concluyen que el cálculo del aclaramiento de creatinina junto a la valoración de las lesiones vasculares pueden predecir la función renal en el receptor y son de utilidad para seleccionar a los donantes de alto riesgo (14). Los riñones de donante que tienen una puntuación global igual o superior a 6, empleando su sistema de puntuación, se asocian con un 100% de incidencia de retraso en el inicio de la función renal en el receptor (14).

Nosotros hemos establecido un algoritmo de decición sobre la base de la puntuación morfológica global de las lesiones que pueden acontecer en riñones subóptimos. Hemos considerando como riñón apto para cualquier receptor la puntuación <5; riñón apto para donante añoso la puntuación entre 5-8; riñones para trasplante doble la puntación entre 9-12 y no aptos para trasplantes la puntuación >12 ó puntuación de 3 en glomeruloesclerosis, arteriopatía hialina y elastosis miointimal (o alternativamente, o la puntuación acumulada por encima de 8 puntos en estas tres lesiones). Con estos criterios El 56% de los riñones fueron aptos para trasplante simple para cualquier receptor, cuatro de ellos solo para receptores añosos y cuatro para trasplante doble que fueron desechados por no realizarse este tipo de injerto en nuestro centro.

Empleando la citada estrategia las pérdidas de injertos durante el periodo de inducción de tolerancia fue mínima y de igual modo, las cifras de creatinina al final del seguimiento clínico fueron más que aceptables (media de 2,1 mg%) sin que se observaran diferencias estadísticamente significativas entre el grupo de pacientes trasplantados con riñones subóptimos y los que recibieron injertos de donantes sanos.

El hecho de que fueran las puntuaciones totales más altas y los valores de arteriopatía hialina los que mostraron relación con las cifras finales de creatinina tras el seguimiento clínico refuerza nuestra idea de que la biopsia renal pretrasplante es muy útil para discriminar los riñones de donante con reserva funcional inadecuada.

Los resultados sobre marcadores moleculares de lesión indican que los niveles de expresión de TGFß1, endotelina 1 y angiotensinógeno se encuentran incrementados en los riñones subóptimos, pero no han permitido relacionar la puntuación global de las lesiones en los diferentes compartimentos tisulares renales, con los niveles de expresión de los marcadores moleculares a excepción de la endotelina 1. La explicación más plausible es que la neoregulación genética que se produce tras el trasplante renal así como los diversos factores farmacológicos e inmunitarios que afectan al paciente trasplantado modifican su proteómica renal hasta casi hacer irrelevante su situación pretrasplante con excepción de los polimorfismos genéticos del receptor como recientemente ha sido demostrado (15). La relación estadística de la cantidad existente de RNA de endotelina 1 con la creatinina de los receptores del órgano al final del seguimiento clínico refuerza precisamente que las lesiones preexistentes en el riñón de alguna manera condicionarán su evolución postrasplante pues no debe olvidarse que este mediador vascular está incrementado dentro del riñón en la hipertensión arterial (16), el síndrome que más frecuentemente presentaron los donantes de esta serie.

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