Cuba

La historia del cáncer cérvico uterino comienza con lesiones premalignas.
La regresión es frecuente en las diagnosticadas en la adolescencia.
El numero de mujeres con lesiones de bajo grado que terminan en cáncer invasivo es menor del 20% y con excepción del virus del HPV no se sabe cuales factores determinan el curso de la afección. hasta el momento no se ha considerado la apoptosis como elemento en esta historia.
La apoptosis guarda relación con el estrés oxidativo.
Se intentó esclarecer la presencia de estrés oxidativo en mujeres jóvenes evaluando el status antioxidante en adolescentes y en paralelo se estudio la proporción de estas células en mujeres en la cuarta década de l a vida

Materiales y métodos

pacientes : 18 adolescentes entre 16 y 18 años atendidas en la consulta de patología de cuello del hospital nacional.
a todas se les realizó colposcopía y citología. Se les evaluó los niveles de vitaminas c , beta carotenos y malonildialdehído.
Se aplicó el juego de reactivos de Boheringher Manheim para la detección de muerte celular por apoptosis .
Las determinaciones de indicadores de estres oxidativo y capacidad antioxidante se realizaron en suero.
Para los estudios citohistológicos , estos se conservaron en solución Hanks a 4 oc y edta 0.2m.
Las biopsias se conservaron en una solución de nitrobluetetrazolium a 1 ug/ml

Resultados y discusión

No se encontraron alteraciones en el estado de los antioxidantes ni en el indicador de estrés oxidativo.
en todas las biopsias se aprecia la presencia de anión superoxido, lo que sugiere que aun en ausencia de estrés sistémico en el epitelio cervical se esta generando eros.


Conclusiones

se presentan evidencias que aun en ausencia de estrés oxidativo se detecta reducción del nbt

La historia natural del cáncer cérvico - uterino comienza con lesiones premalignas.
la regresión es muy frecuente especialmente entre aquellas diagnosticadas en la adolescencia .(1)

La proporción de mujeres con lesiones de bajo grado que terminan en cáncer invasor es menor que el 20 % y con excepción del tipo de papiloma virus humano (pvh) no existen indicios de cuales son los factores que determinan el curso de la afección. 2. hasta el momento no tenemos referencias en que se haya considerado la apoptosis como elemento importante en la historia del cáncer cérvico uterino (ccu).
La apoptosis o muerte celular programada (mcp) es una forma de muerte celular presente en muchos procesos fisiológicos como la regresión del timo y el cuerpo lúteo y otros patológicos como en algunas enfermedades neurodegenerativas. 3.
La mcp guarda relación con el estrés oxidativo: el aumento de las especies reactivas del oxigeno (eros) o la disminución de los niveles de antioxidante pueden inducirla. Muchos inductores de mcp son generadores de eros y la mcp puede ser bloqueada por antioxidantes. 4
En un intento de esclarecer la presencia de estrés oxidativo en mujeres jóvenes con lesiones premalignas del cervix, se evaluó el status antioxidante en adolescentes con diagnostico de neoplasia intraepitelial cervical (nic). en paralelo se estudió la proporción de células en apoptosis en una muestra de adolescentes y mujeres en la cuarta década de la vida.

Sujetos: 18 adolescentes entre 16 y 18 años atendidas en la consulta de patología de cuello del Hospital general docente" Enrique Cabrera”.
a todos se les realizó colposcopía y citología.
Se le evaluaron los niveles de vit c, betacarotenos y malonildialdehidos (mda). Para todas las determinaciones se aplicaron los pno del Cibiomed.
En 12 mujeres con citologías negativas ( 5 entre 15 y 18 anos y 7 entre 25 y 37años ) se aplicó el juego de reactivos de Boheringher Manheim para la detección muerte celular por apoptosis , se analizaron 5 x10 3 por individuos .(5)
Antes se verificó la supervivencia una hora después del raspado cervical mediante tinción con tripan blue para excluir aquellas muestras con mas de un 10 % de células permeables al colorante.

Toma de la muestra.
La determinación de indicadores de estrés oxidativo y capacidad antioxidante se realizaron en suero.
Para los estudios citohistologicos se realizó un raspado con espátula de Ayre la que luego se introdujo en un frasco Corning de 50 ml , que contenía solución Hank a 4 grados Celsius y EDTA 0, 2 m , el frasco se cerró herméticamente y se trasladó en una bolsa térmica hasta el laboratorio en un lapso siempre inferior a una hora .
Cinco biopsias se tomaron en el quirófano y se introdujo un fragmento de 0,2 cm3 en una solución de nitrobluetetrazolium 1 μg/ml posteriormente se colocaron a -70 grados hasta su procesamiento histoquímico. (6).

No se encontraron alteraciones en el estado de los antioxidantes ni el indicador de estrés oxidativo.
En todas las biopsias, independiente del grado de lesión dos NIC I y tres NIC II se apreció el mismo patrón que indica la presencia de anión superoxido. En la muestra aunque se aprecian amplias zonas sin precipitado azul, la presencia de este anión es indicativo de estrés oxidativo local. esto sugiere que aun en ausencia de estrés oxidativo sistémico en el epitelio cervical se está generando Eros. El hecho de que no existieran signos de cervicitis ni infecciones cervicales no excluye la posibilidad de que la fuente de al menos parte de estas Eros sean producto de células del sistema inmune. paradójicamente en el epitelio transformado el estrés oxidativo parece menor
En el estudio de la población de células apoptóticas se detectaron olgonucleosomas (oln) en todas las muestras, hallazgo que confirma la presencia de mcp en este epitelio. Sin embargo , se pareció una tendencia a que el factor de enriquecimiento de oln , que es la medida de la intensidad de la mcp fuera mayor en el grupo de menor edad ( 1.545 vs. 1.12)
La muestra estudiada es muy pequeña para afirmar que la mcp es mas intensa en la adolescencia pero si permite sustentar algunas reflexiones sobre el papel de a apoptosis en la remodelación del epitelio cervical. Este proceso es atribuido al estimulo de los estrógenos y al desarrollo de una flora de lactobacilos, la acidificación y la consiguiente sustitución d l epitelio cilíndrico por uno escamoso. Las hormonas esteroideas son capaces de producir apoptosis en células sensibles como ocurre en la eliminación de los linfocitos T inmaduros a partir de la interacción con receptores, aunque estas hormonas pueden actuar como intermediarios radicalares e inducir apoptosis per se . 7.
Por otra parte la acidificación del medio puede activar nucleasas que pudieran ser el desencadenante de la MCP .De manera que concurren varios hechos que pueden explicar la remodelación del cerviz con la MCP como evento subyacente. 8.9.
Se aumento el estudio de la muestra haciendo estudio COMETA a 18 mujeres: 10 casos estaban entre 14 y 17 años u 8 casos estaban entre 25 y 35.
La proporción de células con:
1- fragmentación nuclear.
2- Cometas largos.
3- Cometas anchos
En los casos entre 14 y 17 años fue mayor.
No eran expuestas a genotoxicos ni fumadoras.
La proporción de células sin daño fue menor entre 20 y 25.
En los casos con NIC no aumentaron los cometas.
Esto indica un incremento de la población celular que mueren según programa (apoptosis) en las edades mas tempranas de la vida y coinciden con el estudio inmunoenzimatico. (oligonucleosomas teñidos con azul de formazán).

Tabla 1 Indicadores de estrés oxidativo y capacidad antioxidante de acuerdo al tipo de NIC

Números de sujetos por el grado de lesión	MDA	Vitamina C ?M/mL	? Carotenos ? M/L
(12) NIC I	2.58	95.3	1.03
NIC II	2.61	96.7	1.35
Media	2.59	96.0	1.19

Tabla 2 Intensidad de la aparición de azul de formazán

Epitelio Normal XXX	NIC II XXX
Estroma XXXX	Vasos XXXXX

La X indica la cantidad de células teñidas

Se presentan evidencias de que aun en ausencia de estrés oxidativo sistémico se detecta reducción del NBT en el cérvix así como fragmentos de ADN unidos a oligonucleosomas en células exfoliadas, con mayor intensidad en el grupo de menor edad.

Queda por establecer el paralelismo entre la intensidad de la MCP y el curso de la destrucción del epitelio cilíndrico.

1. Munoz N, bosh FX. Human papiloma Virus and cervical Cancer . Moz N, bosh FX, Jensen OM ( eds) IARCScientific Publication No. 94. Lyon 9-40. 1989
2. Shikano K, Sasano H, itoK .Tohoku J Exp med 169:279-288, 1993.
3. Vaux DL, Strasser A. Proc Natl Acad Sci USA 93:2239-44, 1996
4. Wood KA, Youle RJ. Ann NY Acad Sci 738 :400-7, 1994
5. Guide to cell Proliferation and apoptosis Methods. Boheringer mannheim
34-60.1997.
6. Baabs CF .methods in Enzimology 233: 619-29. Academy press INC, San Diego,
1994.
7. Iwata M. Current topic in Microbiology and Inmunology 200:81-94. 1995.
8. Goya RG Exp clin Inmunosenescence. 9:188-194.1992.
9. lander HM FASEB J.11:118-194, 1997.

El 28/3/2004 15:25, Dr.Ernesto Barrios dijo:

El 31/3/2004 11:11, Dra Casanova dijo: