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Introducción: Las metaloproteasas (MMPs) son un grupo numeroso de enzimas capaces de degradar componentes de la matriz extracelular (MEC). La colagenasa-3 (MMP-13) es un miembro de la superfamilia de las colagenasas identificada inicialmente en células cancerosas de mama (Freije et al., 1994). La endometriosis, aún siendo un proceso benigno, es una enfermedad con un comportamiento similar al proceso tumoral en cuanto a su capacidad invasora y metastásica. Se ha identificado una expresión anómala de diferentes MMPs y sus inhibidores en las lesiones endometriósicas lo que contrasta con el adecuado equilibrio que presentan en el endometrio uterino. En este trabajo nos propusimos analizar si la colagenasa-3 se expresa en el endometrio ectópico de un grupo de pacientes afectas de endometriosis.

Material y métodos: se recogieron muestras tisulares de 24 pacientes premenopáusicas (edad media: 43 años), diagnosticadas y tratadas quirúrgicamente de endometriosis estadio III-IV. También analizamos el endometrio eutópico de 16 de estas pacientes y de 17 pacientes sin endometriosis (edad media: 46,6 años). La determinación de colagenasa-3 se realizó mediante inmunohistoquímica utilizando anticuerpos monoclonales sobre cortes de parafina de 5µ de grosor y siguiendo el método EnvisiónTM (DAKO). Las tinciones fueron evaluadas por un anatomopatólogo considerando como positivos los casos que mostraban al menos un 10% de células teñidas.

Resultados: se detectó expresión proteica de colagenasa-3 en 11 de los 24 endometrios ectópicos analizados (45,8%). En los casos positivos, la tinción inmunohistoquímica se localizó más intensamente en el epitelio endometrial y de forma débil en el estroma. Sin embargo, de las 33 muestras de endometrio eutópico ninguna mostró tinción positiva para la colagenasa-3, independientemente de si eran de pacientes con o sin endometriosis.

Conclusión: el endometrio ectópico de la endometriosis parece expresar colagenasa-3, lo que podría contribuir, junto con otras MMPs, a una mayor actividad proteolítica e invasora del endometrio.

Las metaloproteinasas (MMPs) son un grupo numeroso de enzimas capaces de degradar componentes de la matriz extracelular (MEC). Se clasifican básicamente en cuatro grupos: colagenasas, gelatinasas, estromalisinas y MMPs de membrana. Están implicadas en diferentes procesos fisiológicos que conllevan la remodelación y desarrollo tisular, como son la reparación de tejidos, desarrollo fetal, ovulación, menstruación, etc. Sin embargo, también participan en numerosos procesos patológicos como son la invasión y metástasis, la artritis reumatoide, ateroscelrosis, endometriosis, etc. La colagenasa-3 (MMP-13) es un miembro de la subfamilia de las colagenasas identificada inicialmente en células cancerosas de mama (Freije et al., 1994) y cuya expresión ha sido descrita en diferentes tumores como son el cáncer de esófago, colon, cabeza y cuello y escamoso de vulva, facilitando la invasión y metástasis gracias a su función degradativa del colágeno de la MEC. Además, se ha vinculado con una cascada proteolítica en la que también participan la MMP-2 y la MT1-MMP. Por otra parte, se ha identificado una mayor expresión de estas dos MMPS en el endometrio de pacientes afectas de endometriosis (Chung et al., 2002).
La endometriosis, aún siendo un proceso benigno, es una enfermedad con un comportamiento similar al proceso tumoral en cuanto a su capacidad invasora e, incluso, a su capacidad metastásica. Se ha identificado una expresión anómala de diferentes MMPs y sus inhibidores en las lesiones endometriósicas, lo que contrasta con el adecuado equilibrio que presentan en el endometrio uterino. Por último, también se ha propuesto a las MMPs como una posibles dianas terapéuticas para esta enfermedad. Sin embargo, aún no se ha investigado la presencia y significado clínico de la colagenasa-3 en la endometriosis.
Por todo ello, en este trabajo nos propusimos analizar si la colagenasa-3 se expresa en el endometrio ectópico de un grupo de pacientes afectas de endometriosis y, en el caso de hacerlo, evaluar el patrón de dicha expresión.

Pacientes y muestras tisulares
Se recogieron muestras tisulares de 24 pacientes premenopáusicas con una edad media de 43 años (intervalo: 27-50 años), diagnosticadas y tratadas quirúrgicamente de endometriosis estadio III-IV en el Hospital de Jove de Gijón durante los años 1999-2002. También pudimos obtener el endometrio eutópico de 16 de estas pacientes. Asimismo, se recogieron muestras de endometrio eutópico no patológico de 17 pacientes sin endometriosis intervenidas quirúrgicamente por patología benigna. La edad media de este grupo control fue de 46,6 años (34-54 años) correspondiendo 14 casos a endometrios en fase proliferativa y 3 a fase secretora.
Tinción inmunohistoquímica
Las tinciones inmunohistoquimicas se realizaron sobre cortes de tejidos de 5-mm, fijados en formol al 10% y embebidos en parafina, utilizando el Kit de detección EnVisionTM, peroxidasa/DAB, DAKO. El anticuerpo contra MMP-13 (diluido 1:200 en Antibody Diluent; Dako) se incubo a temperatura ambiente durante 30 min. Posteriormente, las preparaciones fueron incubadas con EnVision; Dako por 30 minutos a temperatura ambiente, y la reacción fue revelada con solución de diaminobenzidina concentrada (DAB) en buffer sustrato, que contiene peróxido de hidrógeno.
Análisis estadístico
La relación entre la tinción de MMP-13 y los factores clínico-patológicos fue evaluada mediante el test del Chi-cuadrado, con la corrección de Yates cando fue necesaria. Las curvas de supervivencia libre de enfermedad y de supervivencia global fueron calculadas por el método de Kaplan y Meier, y comparadas con el test log rank.

Se detectó expresión proteica de colagenasa-3 en 11 de los 24 endometrios ectópicos analizados (45,8%). En los casos positivos (figura_1), la tinción inmunohistoquímica se localizó más intensamente en el epitelio endometrial y de forma débil en el estroma. Sin embargo, de las 33 muestras de endometrio eutópico, ninguna mostró tinción positiva para la colagenasa-3 (figura_2), independientemente de si eran de pacientes con o sin endometriosis.

Conclusión
El endometrio ectópico de la endometriosis parece expresar colagenasa-3, lo que podría contribuir, junto con otras MMPs, a una mayor actividad proteolítica e invasora del endometrio. Consideramos interesante realizar nuevas investigaciones que analicen la expresión de colagenasa-3 en pacientes con y sin endometriosis, así como correlacionar esta expresión con otras MMPs como son la MMP-2 y la MT1-MMP.

Freije JM, Díez-Itza I, Balbin M, Sánchez LM, Blasco R, Tolivia J and López-Otín C. Molecular cloning and xpression of collagenase-3, a novel human matrix metalloproteinase produced by breast carcinomas. J Biol Chem, 1994; 269: 16766-73.
Hye Wong Chung, Ji Young Lee, Hye-Sung Moon, Sung eun Hur, Hye Park, Yan Wen, Mary Lake Polan. Matrix metalloproteinase-2, membranous type 1 matrix metalloproteinase, and tissue inhibitor of metalloproteinase-2 expression in ectopic and eutopic endometrium. Fertil Steril 2002; 78: 787-95.

El 10/3/2004 21:12, Dra. Margarita Amigó dijo: